Diplomová práce

Využití foton-upkonverzních nanočástic v imunochromatografických stanoveních

Application of photon-upconversion nanoparticles in lateral flow immunoassays

Bc. Eliška Macháčová
Anotace

Onemocnění albuminurie, charakterizované zvýšenou hladinou lidského sérového albuminu (HSA) v moči, je spojeno s počínající nefropatií u dlouhodobého nebo nekontrolovatelného diabetu. K včasnému odhalení, a tedy zabránění nevratného poškození ledvin, je klíčová schopnost jednoduché a citlivé detekce HSA. Pro detekci klinických analytů jsou díky jejich vysoké specificitě poskytované protilátkami často …více

Abstract

Albuminuria, characterized by an increased level of human serum albumin (HSA) in urine, is associated with incipient nephropathy in chronic or uncontrollable diabetes. The ability of simple and sensitive HSA detection is crucial for early detection and prevention of irreversible kidney damage. Immunochemical assays are widely used to determine the concentrations of clinical analytes in complex samples …více

Zadání práce
Foton-upkonverzní nanočástice (UCNPs) jsou nanokrystaly lanthanoidů, které mají schopnost emitovat viditelné světlo po excitaci infračerveným zářením (anti-Stokesova luminiscence). Oproti tradičním fluoroforům je při jejich detekci potlačen vliv autofluorescence, což umožňuje velmi citlivou detekci s minimálním vlivem optického pozadí. Díky tomu nacházejí UCNPs uplatnění v řadě biologických aplikací, konjugáty s protilátkami nebo streptavidinem mohou být využity například jako značka v různých typech imunostanovení nebo při imunohistochemickém barvení. Cílem této práce bude prozkoumat možnosti využití UCNPs jako značky v imunochromatografických stanoveních (lateral flow immunoassay, LFIA). Nejdříve budou připraveny konjugáty UCNPs se streptavidinem, případně s modelovou anti-králičí protilátkou a budou charakterizovány jejich fyzikální vlastnosti (metodami transmisní elektronové mikroskopie, dynamického rozptylu světla a nanoparticle tracking analysis), funkčnost konjugátů pak bude ověřena pomocí stanovení v mikrotitrační desce. Hlavní částí práce bude vývoj LFIA imunostanovení, bude optimalizována příprava LFIA stripů (především s ohledem na různé typy membrán), průběh stanovení (použité nanočástice, volba reagencií pro dosažení co nejnižší nespecifické vazby) i metodika skenování a vyhodnocení dat. Následně bude zvolen klinicky, případně environmentálně významný analyt (např. lidský sérový albumin) a stanovení bude optimalizováno pro analýzu reálných vzorků. Nakonec bude stejný analyt detekován pomocí LFIA stanovení na bázi konvenčních značek (např. zlaté nanočástice, případně kvantové tečky), což umožní zhodnotit výhody a nevýhody UCNPs.
Práce zkontrolována:
17. 5. 2022 14:19, doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
Plný text práce
2,3 MB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
3. 6. 2022
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D., učo 357740
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

prof. RNDr. Přemysl Lubal, Ph.D., učo 1271
ÚChem Chem PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.