Diplomová práce

Určení vztahu mezi sekvencemi v blízkosti klastrovaných miRNA a jejich expresí

Determination of relationship between sequences in the vicinity of clustered miRNA and their expression

Bc. Jan Oppelt
Anotace

Cílem této diplomové práce bylo naleznout faktory, které mohou regulovat expresi miRNA, a určit jejich vliv za využití dat ze sekvenátorů příští generace. Jako nejlepší model byly vybrány klastrované miRNA, protože sdílí společnou transkripční část, a jejich finální množství je regulováno až později. V průběhu práce jsem úspěšně vypracoval a aplikoval vhodný postup pro získání informací o genové expresi …více

Abstract

The aim of this diploma thesis was to find the factors, which can regulate the miRNA expression and determine their relationship using the next-generation sequencing data. I chose clustered miRNAs as the best model because they share the transcription stage and their final levels are regulated later on. During the work, I have successfully developed and applied a suitable workflow for the miRNA expression …více

Zadání práce
MicroRNA (miRNA) jsou průměrně 22 nukleotidů dlouhé nekódující RNA, které se účastní regulace genové exprese v mnoha fyziologických i patologických procesech. V lidském genomu je zatím identifikováno 1600 prekurzorových miRNA a z toho 323 je kódováno polycistroními geny. To jsou takové geny, ze kterých po transkripci vznikne více než jedna prekurzorová (a později maturovaná) miRNA. O takovýchto miRNA mluvíme jako o klastrovaných. Jednou z definic klastru je, že vzdálenost mezi dvěma miRNA na stejně orientovaném vlákně nesmí být větší než 10000 nukleotidů a je předpoklad existence společného promotoru. Bylo opakovaně popsáno, že klastrované miRNA jsou na počátku přepisovány jako jeden celek, ale výsledná exprese maturovaných miRNA tohoto klastru se signifikantně liší. Předpokládáme, že sekvence, které jsou v blízkosti miRNA nebo jsou přímo její součástí, budou mít k rozdílné expresi určitý vztah a mohou být zodpovědné za pozorované rozdíly v expresi polycistroních miRNA.
RNA-Seq protokol nám dovoluje analyzovat miRNA expresi ve velkém rozsahu a s vysokou přesností. Právě využití dat ze sekvenátorů příští generace nám může pomoci při analýze a identifikování vztahů mezi expresí a sekvencí v okolí miRNA a objasnit fenomén popsaný výše.
Cíle práce:
  • Nastudovat a vypracovat postup analýzy expresních dat z RNA-Seq experimentu zaměřeného na expresi miRNA a ostatních malých RNA
  • Vybrat vhodné datasety z veřejně dostupných databází a aplikovat vytvořený postup pro získání údajů o jednotlivých exprimovaných miRNA
  • Vytvořit seznam vhodných klastrů pro ověření hypotéz
  • Analyzovat sekvence v blízkosti miRNA a pokusit se najít vztahy mezi sekvencemi a expresí miRNA
  • Identifikovat další možné faktory, které by také mohly mít vliv na studovaný problém
Práce zkontrolována:
15. 5. 2013 20:44, prof. MUDr. Mgr. Marek Mráz, Ph.D., učo 101627
Plný text práce
1,9 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
18. 6. 2013
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

prof. RNDr. Radka Svobodová, Ph.D., učo 4056
NCBR PřF MU
prof. MUDr. Mgr. Marek Mráz, Ph.D., učo 101627
MikroIB CMM CEITEC MU

Oponent

RNDr. Lukáš Pravda, Ph.D., učo 256262
abs FI MU, PřF MU

Literatura

  • MRÁZ, Marek; Šárka POSPÍŠILOVÁ; Karla MALINOVÁ; Ivo ŠLAPÁK a Jiří MAYER. MicroRNAs in chronic lymphocytic leukemia pathogenesis and disease subtype. LEUKEMIA & LYMPHOMA. London: Leonidas Platanias, 2009, roč. 50, č. 3, s. 506-509. ISSN 1042-8194.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.