Mikrofluidika je rozvíjející se technologie s potenciálem ovlivnit širokou škálu výzkumných odvětví včetně biologie, fyziky, biomedicíny a chemie. Standardní mikrofluidní zařízení sestává z malých mikrokanálků (desítky mikrometrů), které slouží jako experimentální prostor. Typicky se objemy použitého materiálu v experimentech pohybují řádově v nanolitrech až mikrolitrech. Hlavními výhodami mikrofluidiky jsou minimální vstupy vzorku a reagencií, nízká produkce odpadu, precizní kontrola experimentálních podmínek, snížení časových a finančních nároků na experimenty a nároků na nutné vybavení a rychlý zisk rozsáhlých datových souborů. Přesto však bylo publikováno pouze několik prací věnovaných využití mikrofluidiky v metabolickém inženýrství. Nicméně schopnost rychlého screenování rozsáhlých buněčných kultur a genových knihoven (např. metagenomických nebo mutantních) poskytuje nové možnosti pro výzkum v tomto směru. Společně s výpočetními algoritmy umožňujícími automatizaci výzkumného postupu je možné velmi efektivní multifaktoriální screenování za účelem metabolických optimalizací. V této práci bylo vyvinuto mikrofluidní zařízení pro multifaktoriální optimalizaci metabolické dráhy. Zařízení bylo použito pro stechiometrickou optimalizaci degradační dráhy 1,2,3-trichlorpropanu. Toto úsilí bylo provázeno několika nezbytnými optimalizačními kroky, které jsou v práci popsány. V druhé části práce bylo úspěšně použito stejné mikrofluidní zařízení pro in vitro transkripci a translaci. Výsledky demonstrují možnost využití kapénkové mikrofluidiky pro optimalizaci multienzymových systémů za použití cílových genů jakožto vstupního materiálu. Tento přístup značně zjednodušuje mikrofluidní pracovní postup vyloučením pracné přípravy proteinů klasickými metodami předcházející mikrofluidní analýze. Vyvinutá metodologie a navrhovaný další postup založený na získaných výsledcích bude využit k navazujícímu výzkumu a aplikacím v oblasti multienzymových systémů, syntetické biologie a metabolického inženýrství.