MiRNA byly identifikovány jako klíčové molekuly v post-transkripční regulaci genové exprese. Bylo také zjištěno, že miRNA jsou úzce spojeny s fyziologií lidských embryonálních kmenových buněk a sehrávají důležitou roli v regulaci jejich dvou klíčových vlastností - sebeobnově a schopnosti diferencovat se. Důležité je, že zachování pluripotence a sebeobnovy lidských embryonálních kmenových buněk úzce souvisí s regulací průchodu buněk buněčným cyklem a krátkým buněčným dělením. S nástupem diferenciace naopak dochází k jeho prodloužení. Jakou roli v tomto propojení hrají miRNA není přesně popsáno. Všeobecným cílem této práce je studovat roli miRNA v regulaci buněčného cyklu v průběhu neurální diferenciace lidských embryonálních kmenových buněk. K tomuto účelu budou využity linie lidských embryonálních kmenových buněk derivované v roce 2003 v naší laboratoři a také neurální kmenové buňky derivované ve spolupracující laboratoři na University of California, San Diego. Experimentální práce bude zahrnovat zejména kultivaci eukaryotických buněk in vitro a implementaci diferenciačního protokolu, a také základní molekulárně-biologické metody jako průtoková cytometrie, fluorescenční mikroskopie, RT-qPCR, westen blot, amplifikace a izolace plazmidové DNA a základy využití bioinformatických nástrojů pro analýzu dat. Specifické cíle diplomové práce: 1) Derivace a charakterizace experimentálního buněčného modelu (diferenciace lidských embryonálních kmenových buněk do neurálních kmenových buněk). 2) Charakterizace buněčného cyklu v průběhu diferenciačního procesu. 3) Identifikace kandidátních miRNA specifických pro neurální diferenciaci a/anebo regulaci buněčného cyklu v průběhu diferenciace.